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用于傳統(tǒng)小分子的分離方法如重結(jié)晶、精餾等對(duì)生物分子具有破壞性,因此基本上不能用于生物大分子分離純化,使得生物大分子的分離面臨極大挑戰(zhàn)。層析技術(shù)具有極高的分離純化效率,且條件溫和,在分離純化過(guò)程中容易保持生物分子的活性,因此層析技術(shù)已成為生物分離的主要的工具。層析分離過(guò)程是把混合樣品從裝有層析柱的一端進(jìn)去,由于不同生物分子其尺寸、電荷、疏水等物理性能有差異,使得其與層析柱填充的介質(zhì)作用力(或吸附強(qiáng)度)不同,導(dǎo)致不同分子在層析柱保留時(shí)間不同,因此不同組分的分子可以按順序從柱子另外一端流出來(lái)以達(dá)到分離的目的。層析分離效果主要取決于其層析柱中的層析介質(zhì)微球。由于層析分離純化技術(shù)牽涉到材料、生物、化學(xué)等交叉技術(shù)領(lǐng)域,因此層析介質(zhì)制備技術(shù)門檻高,用于生物分離的層析介質(zhì)中國(guó)基本依賴進(jìn)口。
Tantti系列的陰離子整體柱已在流l感病毒純化中取得不錯(cuò)的驗(yàn)證效果,該系列產(chǎn)品批次穩(wěn)定性好,且大到能做到9cm直徑規(guī)模,可滿足中試級(jí)病毒純化需求??梢灶A(yù)期,孔徑可精l確控制且批次重復(fù)性好的整體柱一定成為病毒分離純化的理想材料。
層析分離效果很大程度上取決于層析介質(zhì)材料,層析技術(shù)重大進(jìn)步往往是隨著新的材料的出現(xiàn)而發(fā)展的。高機(jī)械強(qiáng)度超大孔結(jié)構(gòu)微球研究成功將推動(dòng)傳統(tǒng)層析介質(zhì)在病毒及類病毒(疫l苗)分離純化的廣泛應(yīng)用;單分散無(wú)孔層析介質(zhì)開(kāi)發(fā)成功可以極大提高病毒的純度;而以單分散微球?yàn)槟0逯苽淇讖娇煽氐恼w柱將變革病毒分離純化技術(shù)。納微將一如既往引l領(lǐng)分離純化介質(zhì)的,促進(jìn)病毒分離技術(shù)的應(yīng)用。
之一:?jiǎn)畏稚⒒蛱娲喾稚⒒? 層析介質(zhì)粒徑大小和粒徑分布是影響層析分離的重要參數(shù)。粒徑分布越均勻,裝柱越容易、柱床越穩(wěn)定、柱效越高、流速越均勻、洗脫越集中、分離效率越高、流動(dòng)相用量越少,柱與柱重復(fù)性也越好;Protein A 介質(zhì)被譽(yù)為層析介質(zhì)皇冠上的明珠,價(jià)格昂貴,可是市場(chǎng)上Protein A 介質(zhì)都是采用粒徑分布較寬的基球。主要原因是單分散微球制備技術(shù)難度極大,世界上可以規(guī)模生產(chǎn)的單分散多孔微球只有Dynal公司一家,GE銷售的SOURCE 系列單分散聚l色譜填料就是Dynal生產(chǎn)的。但SOURCE 產(chǎn)品的粒徑只有30微米,不能滿足Protein A 介質(zhì)對(duì)粒徑一般要大于40微米的要求。納微經(jīng)過(guò)多年的努力開(kāi)發(fā)出世l界領(lǐng)l先的微球精準(zhǔn)制備技術(shù),突破大單分散大粒徑多孔微球的制備難題,成為全球家生產(chǎn)單分散Protein A 親和層析介質(zhì)的公司。
之三:高度交聯(lián)聚丙l烯酸酯基球替代軟膠或低交聯(lián)的聚丙l烯酸酯基球 高機(jī)械強(qiáng)度介質(zhì)不僅可以耐受更高流速、更高壓力、更大粘度樣品,還可以裝更高的柱床,以增加抗l體批處理量、提高抗l體生產(chǎn)效率、減少設(shè)備投資、減少?gòu)S房占用面積。因此納微Protein A 介質(zhì)是選擇高度交聯(lián)的聚丙l烯酸酯基球,與市場(chǎng)上以瓊脂糖或低交聯(lián)度聚丙l烯l酸酯為基球生產(chǎn)的Protein A 介質(zhì)相比具有溶脹系數(shù)小、壓縮比例低、而且機(jī)械性能強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)證明 UniMab在2公斤裝柱壓力下,其柱床壓縮比例只有5%,而無(wú)論是GE 生產(chǎn)的以瓊脂糖為基球還是Tosoh 生產(chǎn)的低交聯(lián)聚合物為基球的Protein A 介質(zhì)壓縮比例往往超過(guò)15%。