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轉錄組測序
轉錄組即某個物種或特定細胞在某一功能狀態下產生的RNA的總和,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。miRNA在細胞生長和發育過程中起多種作用,包括調控發育、分化、凋亡和增殖等。與基因組不同的是,轉錄組的定義中包含了時間和空間的限定。同一細胞在不同的生長時期及生長環境下,其基因表達情況是不相同的。轉錄組測序(RNA-Seq)是指利用第二代高通量測序技術進行cDNA測序,快速地獲取某一物種特定qi官或組織在某一狀態下的轉錄本。相對于傳統芯片而言,RNA-Seq無需預先設計探針,即可對物種的細胞類型的轉錄組進行檢測,能夠提供較的數字化信號,更高的檢測通量以及更廣泛的檢測范圍,是目前深入研究轉錄組復雜性的良好工具。
分子生物學檢測服務
隨著生命科學和化學的不斷發展,人們對生物體的認知已經逐漸深入到微觀水平。miRNA測序microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關。從單個的生物體到qi官到組織到細胞,再從細胞結構到核酸和蛋白的分子水平,人們意識到可以通過檢測分子水平的線性結構(如核酸序列),來橫向比較不同物種,同物種不同個體,同個體不同細胞或不同生理(病理)狀態的差異。這就為生物學和醫學的各個領域提供了技術平臺。分子生物學檢測技術是現代分子生物學與分子遺傳學取得進步的結晶,是在人們對基因的結構以及基因的表達和調控等生命本質問題的認識日益加深的基礎上產生的。近年來,分子生物學檢測技術的方法學研究取得了進展,先后建立了各種分子生物學檢測技術。
活性氧檢測試劑盒(Reactive oxygen species assay kit)是一種利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。逆轉錄病毒載體主要優點:轉染范圍廣,可以各種細胞類型,轉入的外源基因可完全融合,對細胞率高,細胞不產生病變,可建立細胞系長期持續表達外源基因。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。 本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup以便于活性氧的檢測。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。
一、注意事項
1、探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針,否則會導致背景較高。
2、探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進行激發波長的掃描和發射波長的掃描,以確認探針的裝載情況是否良好。
3、盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),以減少各種可能的誤差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。