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全自動核酸提取儀如何操作呢?
核酸提取儀配套試劑及其操作步驟,買了儀器后一定要考慮后續使用配套試劑的問題:
1)配套試劑是否齊全。不同樣本類型的提取試劑盒產品鏈是否完整
2)配套試劑是不是預封裝。非預封裝的試劑需要實驗員用移液器加入裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑,并沒有減少人工操作時間;
3)提取前除了加樣本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并沒有掌握裂解液中預封裝蛋白酶K且常溫儲存的技術,蛋白酶K需要-20℃單獨保存,需即用即加。每個樣本多加一步蛋白酶K,96個樣本多了10~15min左右的操作時間。
4)配套試劑的保存溫度。有些廠家的提取試劑需要在2—8℃運輸保存,冷鏈運輸增加運輸成本,保存需要在冰箱中,而預封裝提取試劑體積較大,在用量大特別像這樣大批量的使用,完全沒有足夠冰箱可以進行一段時間試劑的儲存空間。
5)提取后的擴增效率。提取核酸時觀察磁珠殘留率并且檢測提取核酸質量!
全自動核酸提取儀的特點
核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。
1. 能夠實現自動化、高通量操作。
2. 操作簡單、快速。
3. 安全環保。
4. 高純度,高得率。
5. 無污染,且結果穩定。
6. 成本低廉,便于廣泛應用。
7. 可以同時處理不同類型的樣本。
全自動核酸提取儀使用注意事項
1. 儀器的安裝環境:正常的大氣壓(海拔高度應該低于3000m)、溫度20-35℃、典型使用溫度25℃、相對濕度10%-80%、暢通流入的空氣為35℃或以下。
2. 避免將儀器放置在靠近熱源的地方,如電暖爐;同時為防止電子元件的短路,應避免水或者其他液體濺入其中。
3. 進風口和排風口均位于儀器背面,同時避免灰塵或纖維在進風口聚集,保持風道的暢通。
4. 核酸提取儀離其他豎直面至少10cm,
5. 儀器接地:為了避免觸電事故,儀器的輸入電源線必須接地。
6. 遠離帶電電路:操作人員不得擅自拆解儀器,更換元件或進行機內調節必須有持證的維修人員完成,不要在接通電源的情況下更換元件。
全自動核酸提取儀——原理介紹
磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結
1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉移液體來實現核酸的提取,一般通過操作系統控制機械臂來實現轉移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質,在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通過固定液體,轉移磁珠來實現核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現核酸的提取。