細胞培養中常見的污染及解決方法

黑點污染

黑色的游動點能穿透濾膜并在空氣中擴散。它們在低倍鏡下顯示為黑色圓點，在高倍鏡下顯示為可移動的黑點。培養液也不渾濁，一般影響較小，因此細胞仍可使用。通常，黑點污染后，細胞生長良好，運動物體無明顯增加，培養基的顏色和透明度無明顯變化。(autophagicvacuoloAV)2、在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成由于電鏡耗時長，不利于監測(Monitoring)自噬形成，人們利用LC3在自噬形成過程中發生聚集的現象開發出了此技術。在同一批培養的細胞中也可以發現類似的現象。

解決方法：黑點對細胞生長狀態沒有明顯影響，細胞增殖后會自然消失，因此除了置換外，無需特殊處理。如果細胞可能被小的運動點污染，建議增加培養皿細胞密度，以提高細胞存活率。

細胞培養中常見的污染及解決方法

真菌污染

真菌污染后，培養基一般清澈，保持原色。細絲可以在顯微鏡下觀察到。，一些真菌類似于死細胞碎片，但其中許多清晰可見，看起來像珊瑚，比較容易區分。雜交瘤細胞基因測序雜交瘤細胞有丟失高特異性高活性的風險，或者細胞狀態不好乃至。此外，它們會慢慢長出細細的黑色細絲，因為它們生長得比較慢，不像細菌那樣容易被發現，一旦發現培養基被污染，它們將很難存活。

解決方法：一旦被真菌污染，果斷丟棄，然后對細胞房、CO2 培養箱、器皿和培養基進行消毒。

Q:如何避免中沉淀物的出現？

A:首先要注意正確的解凍步驟，而且溶解過程中一定要每隔一段時間均勻而緩慢的搖動。我們已經發現在下列情況下沉淀物可能增加，使用中應該盡量避免：

（1）熱滅活；

（2）在 37℃ 下培養；

（3）反復凍融；

（4）γ 射線照射；

（5）長期儲存在 2-8℃；

（6）在室溫下放置時間過長

Q:如何去除中的沉淀？

A:如想去除這些絮狀沉淀物，可以將分裝到無菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養基 內一起過濾。

注意：不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因為這可能阻塞濾膜。