3輕柔刺激法
此方法在短期的睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多，當(dāng)實(shí)驗(yàn)人員通過(guò)觀察大鼠行為或通過(guò)腦電波監(jiān)護(hù)觀察到大鼠進(jìn)入睡眠時(shí)，通過(guò)輕輕拍打大鼠籠子或應(yīng)用聲音、光線的刺激促使大鼠保持清醒，必要時(shí)還可用紙卷、鉛筆或用手直接觸摸大鼠使大鼠無(wú)法進(jìn)入睡眠。注意不能將大鼠移出籠外!此方法簡(jiǎn)單易行，在腦電監(jiān)護(hù)情況下可進(jìn)行 TSD 或 SSD 實(shí)驗(yàn)，在無(wú)腦電監(jiān)護(hù)時(shí)需要實(shí)驗(yàn)人員在旁不間斷觀察大鼠行為，故較適合行短時(shí)間的睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)。
4睡眠剝奪法
定時(shí)給大鼠注she， 此類方法簡(jiǎn)單易行，操作方便，不需要特殊儀器。缺點(diǎn)是大鼠存在個(gè)體差異， 睡眠剝奪的效果及程度及不易掌握。多用在研究某些特殊藥理作用的實(shí)驗(yàn)中。
造模方法步驟
一、.盲腸jie扎穿刺法（CLP）：
1.實(shí)驗(yàn)開始前禁食不禁水12h，小鼠腹腔注射戊巴b妥鈉，待小鼠wan全ma醉后仰臥位固定。
2.對(duì)腹部噴酒精和碘伏消毒，去除腹部表面毛發(fā)，使用手術(shù)刀在腹壁切2cm切kou，暴露盲腸，在回盲瓣遠(yuǎn)端結(jié)扎盲腸，然后用針ci穿刺盲腸2次，輕輕擠壓盲腸，使少量的腸內(nèi)容物滲出，將盲腸復(fù)位，縫合腹膜和皮膚。
3.小鼠正常飼養(yǎng)6h后皮xia注she30ml/kg生理鹽水和30mg/kg的頭bao曲松。
藥xiao學(xué)實(shí)驗(yàn)-減肥功能的動(dòng)物試驗(yàn)評(píng)價(jià)方法
1 測(cè)試項(xiàng)目
1.1 原理
這種方法是用高熱量食物誘導(dǎo)動(dòng)物肥胖，然后給試驗(yàn)樣品（肥胖模型），或者同時(shí)給高熱量食物給試驗(yàn)樣品（肥胖預(yù)防模型），觀察其變化動(dòng)物體重和體脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF級(jí)雄性大鼠，體重180-220g，8-12只/組。在屏障系統(tǒng)下，給大鼠喂養(yǎng)維持飼料并觀察5-7天。按體重隨機(jī)分為兩組，10只給予維持飼料作為空白對(duì)照組，60只給予高熱量模型飼料。每周記錄喂食量、灑食量、剩食量，稱體重1次。喂養(yǎng)2周后，將給予高熱量飼料的60只大鼠按體重增加進(jìn)行排序，剔除1/3體重增加較低的抗肥胖大鼠。選取40只肥胖敏感大鼠給予高熱量飼料6周，空白對(duì)照組同時(shí)給予維持飼料。
無(wú)水乙醇
二jia苯
高碘suan
偏重亞硫酸鈉
堿性品紅
蘇mu素
中性樹膠
實(shí)驗(yàn)步驟
1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二ija苯Ⅰ20min-二jia苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ10min-無(wú)水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。2、高碘suan溶液處理：切片入高碘suan溶液10min，流水沖洗5min。3、Schiff試劑處理：切片入Schiff試劑10min，流水沖洗5min。4、蘇mu素染色：切片入蘇mu素染液1min，流水沖洗5min。5、快速脫水：將切片依次放入95%酒精I(xiàn) 5min -95%酒精I(xiàn)I 5min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min -無(wú)水乙醇Ⅱ5min -二jia苯Ⅰ5min -二甲benⅡ5min中脫水透明，將切片從二甲ben拿出來(lái)稍晾干，中性樹膠封片。6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。
染色結(jié)果：糖原呈紅色，細(xì)胞核藍(lán)紫色。
注意事項(xiàng)
染色后標(biāo)本應(yīng)及早觀察和記錄，染色后標(biāo)本保存8天后，將逐漸褪色，保存時(shí)間延長(zhǎng)，褪色更為明顯。