全自動核酸提取儀簡介
核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。它可替代原來復雜的手動操作,儀器自動完成對細胞或組織的處理,分析提取出目標DNA/RNA。
目前市場上的核酸提取儀的提取原理主要分為兩種:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市場主流地位。
磁珠法提取核酸是通過細胞裂解液裂解細胞,從細胞中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中。反應一定時間之后,再在磁場作用下,使磁性顆粒與液體分開,回收顆粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。
全自動核酸提取儀——原理介紹
磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結
1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉移液體來實現核酸的提取,一般通過操作系統控制機械臂來實現轉移。提取過程如下:
1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質,在外加磁場作用下,將液體移出。
4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通過固定液體,轉移磁珠來實現核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現核酸的提取。
全自動核酸提取儀分類
根據儀器型號大小不同劃分
1) 自動液體工作站
自動液體工作站是功能非常強大的設備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增、檢測等功能,實現標本提取、擴增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應用,不太適合常規實驗室提取核酸,一般都應用在單一類標本并且一次提取標本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。
2) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器是通過運行結構的特殊性來達到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應用。
全自動核酸提取儀的作用
伴隨著分子生物學技術性的快速發展趨勢,以核酸混種雜交、核酸增加及核酸編碼序列剖析等為代表的分子診斷和檢測設備的關鍵功效日益突顯。試品前解決所耗費的時間段占全部解析流程的60%,而檢驗偏差的90%發生在前解決行業。核酸獲取做為分子診斷試驗重要的一步,其得到的核酸品質好壞立即危害到中下游分子生物學實驗的成功與失敗。