過磷酸鈣施入土壤后發生哪些變化?
過磷酸鈣施入土壤后,進行著各種化學的、物理化學的和生物學的轉化。各地實踐證明,過磷酸鈣的利用率較低,一般只有10%~25%,其主要原因是生成溶解度低,有效性較差的穩定性磷化合物。
當過磷酸鈣施入土壤后,水分從土壤周圍向施肥點匯集,使磷酸一鈣溶解和水解,形成一種磷酸一鈣、磷酸和含水磷酸二鈣的飽和溶液,比原來土壤溶液中磷酸離子的濃度高,與周圍溶液形成了濃度差,磷酸就不斷地向四周土壤擴散。在擴散過程中,磷酸逐步與土壤中多種離子起反應,同時,磷酸一鈣溶解后,會引起土壤溶液pH反應急劇下降,能把土壤中的鐵、鋁、鈣、鎂等成分溶解出來,與磷酸發生化學作用,形成不同溶解度的磷酸鹽沉淀。
過磷酸鈣與有機肥料混合施用過磷酸鈣與有機肥料混合施用為什么會提高磷的有效性呢?這是由于過磷酸鈣與有機肥料混合時,可以減少過磷酸鈣與土壤直接接觸而被固定的機會。被有機肥料包圍的過磷酸鈣顆粒,在土壤溶液中慢慢釋放出磷素供作物利用。
有機肥料與過磷酸鈣混合施用還能抑制過磷酸鈣中的磷酸轉化為溶解性低的磷酸鹽形態。有機肥料中的一些有機陰離子如檸檬酸、草酸、丙二酸、蘋果酸和酒石酸等有機酸能使鈣沉淀,從而減少磷酸轉化為不溶性的鈣磷酸鹽,提高磷肥的有效性。
提高磷酸鈣轉染法效率的共通步驟,目的都是為了避免產生會被細胞內吞、加工失效的大顆粒沉淀。
提高轉染效率的操作有以下這些:
1、將小分子DNA整合在高分子質量基因組DNA上,以大分子作為運載體,能提高轉染效率。
2、測試緩沖液適合的ph,可制備幾批pH范圍為6.90~7.15的HEPES鹽緩沖液,分別測試緩沖效率,找到適pH值。
3、使用轉染促進劑,如甘油、氯喹、其他可購買的轉染促進劑。因為這些試劑對細胞有一定毒性,因此,應針對每種細胞系通過實驗確定轉染促進劑處理的佳時機、時長和強度。
除了這些共通的步驟,不同廠家還會對混勻DNA和磷酸鈣的速度有要求。有些方法要求只能輕輕攪動,有些建議用移液器溫和吹吸混勻,有些則提倡應緩慢混合。
因此,在使用磷酸鈣轉染時,應針對不同試劑和細胞系,耐心調整實驗參數,才是獲得高轉染效率的關鍵。