5分鐘前 外泌體粒徑及濃度服務信賴推薦「科銳諾」[科銳諾44070b2]內容:外泌體作為活1細胞分泌的含有RNA 和蛋白質的微囊泡,直徑為 30-150nm之間,廣泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多種體液中。研究表明,外泌體包含多種活性分子,如蛋白質、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非編碼RNA ) 等, 能作為信號分子傳遞給靶1細胞,介導細胞間的物質傳遞與信息交流,文獻報道體液中外泌體 RNA (特別是miRNA 等非編碼RNA)在不同的疾病模型中存在明顯的表達差異。同時,這些分子被外泌體的脂膜所包裹和保護, 能保持其原有穩定性和生物學功能, 已經成為液體活檢的重要分子標志物。近年來, 外泌體已成為科研熱點,其在臨床上巨大的應用價值, 引起了眾多研究者以及商業人士的濃厚興趣。隨著相關技術的發展, 有關外泌體在臨床疾病(尤其是腫1瘤)的早期診斷、治1療、預后及伴隨診斷的應用研究正在蓬勃開展。通過高通量技術對外泌體 RNA進行測序, 可快速高1效獲得外泌體RNA 的全1面信息,是疾病診斷和隨訪的理想手段。

NTA可以提供樣本中顆粒的粒徑分布和絕1對濃度,但不能夠以NTA所提供的濃度數值這個單一的指標來定量外泌體。首先,我們必須理解NTA檢測原理:該技術基于布朗運動,通過視頻分析顆粒計數,可同時獲取樣本中顆粒的粒徑和絕1對濃度。
因此,樣本中的所有顆粒,都會被偵測并計入,而不能篩選出外泌體單獨進行計數;同理:也不能通過NTA所提供的粒徑分布情況這個單一的指標判斷所提取出的內容物就是外泌體;例如下圖為常見的粒徑濃度分布圖,可以說明所提取的內容物是在外泌體粒徑范圍內,但是否為外泌體還需要結合其他方法綜合驗證,譬如:透射電鏡、western blot等。

外泌體的組成:外泌體主要含有融合蛋白和轉運蛋白、熱休1克蛋白(HSP 70)、CD類蛋白以及磷脂酶和其他脂質相關蛋白,但是不同來源的外泌體的組成有差異。
外泌體的提取方式:
1、離心法:此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足。
2、過濾離心:這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣純度不足。
3、密度梯度離心法:用此種方法分離到的外泌體純度較高,但是前期準備工作繁雜
4、免1疫磁珠法:這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單,但生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性。
5、色譜法:此種方法分離出的外泌體大小均一,但設備特殊,應用不廣泛。
