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1分鐘前 咸陽切片病理服務周到 南京英瀚斯生物科技[英瀚斯2eefa30]內容:大鼠胃yan模型大鼠胃yan模型

【造模機制】以15%氯化鈉配制的60%乙醇可以模擬高鹽和乙醇對胃的刺激作用,并在用前加熱至55℃可模擬高溫食物對胃的刺激作用;脫氧膽酸鈉可以模擬十二指腸液(內含膽汁)反流對胃的刺激作用。

【造模方法】Sprague Dawley大鼠,雄性,平均體重170g。脫氧膽酸鈉需每次灌胃前新鮮配制,終濃度為20mmol/L。灌胃用60%乙醇是以15%氯化鈉加無水乙醇配制而成,灌胃前恒溫至55℃。實驗周期共13周。直接法是將酶直接標記在第yi抗ti上,間接法是將酶標記在第二抗ti上,檢測組織細胞內的特定抗原物質。實驗~35天,大鼠自由飲用脫氧膽酸鈉溶液,同時每隔5天以60%乙醇灌胃(10ml/kg)一次,第36~91天,每3天交替飲用脫氧膽酸鈉或15%乙醇,同時每隔7天以60%乙醇灌胃一次。造模期間,配合使用饑飽失常法,即:~56天,飽食2天,禁食1天;第57~91天,飽食2天,禁食禁水1天。13周后,模型組大鼠體重比對照組明顯下降,胃黏膜厚度明顯減小。大體病理可見胃黏膜皺襞變平甚至消失,黏膜血管暴露、黏膜呈顆粒或結節狀,組織病理可見黏膜內炎性細胞聚集、腺體明顯減少,排列不整,黏膜厚度明顯減小。

病理實驗外包,病理染色常見染色介紹Von Kossa染色:簡介:鈣結節的形成為成骨細胞特有,Von kossa染色法是染色礦化結節的經典方法,利用與鈣鹽的復分解反應形成可被還原的銀鹽,在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。【造模機制】以15%氯化鈉配制的60%乙醇可以模擬高鹽和乙醇對胃的刺激作用,并在用前加熱至55℃可模擬高溫食物對胃的刺激作用。

簡要流程:石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→滴染→素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Von kossa染(鈣鹽沉積區域呈黑色或棕黑色,細胞核呈藍色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。Von Kossa染色利用金屬離子置換反應檢測組織中鈣鹽沉積,由溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。使用Image-pro-plus圖像分析軟件對切片拍攝的照片比較累積光密度(IOD)值比肉眼觀測更jing確。

該染色可用于血管鈣化的檢測

病理實驗外包,病理染色組織樣本保存液多聚甲醛的配置:4%多聚甲醛固定液(4% Paraformaldehyde Fix Solution, 4% PFA Fix Solution)是一種廣泛用于組化

(Immunohistochemistry, IHC)、熒光(Immunofluorescence, IF)、細胞化學(Immunocytochemistry, IC)、流式分析(Fluorescence-activated cell sorting, FACS)等檢測時組織、組織切片、細胞等生物樣品固定的溶液。織學上,4%的多聚甲醛穿透力強,固定均勻,能使組織硬化,有利于切片。面對著色深淺不一的組化切片用肉眼觀察的結果只能是定性的,不準確的。該固定劑造成的組織收縮少,損傷小,較為溫和,能很好的保存固有物質,保持組織的抗原性和細微結構。此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂類物質。南京英瀚斯,病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包,病理染色多聚甲醛保存組織的注意事項:

多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。

不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。

多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當的洗滌液或水沖洗數小時仍會有殘留,因此后續實驗結果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。

醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響組化結果。南京英瀚斯生物科技有限公司的團隊實體組建于2013年,前期以“東極生物”運營醫學科研外包業務,是南京國有資產監督參股的,專注于醫學科研外包服務的國家高新技術企業。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行染色等后續操作。

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