注意事項

1. 針頭大小與動物的種類有關，t 同時針頭一定要磨鈍。

2. 檢查灌注泵的運作情況，一定排出管子的氣泡和空氣，防止空氣栓塞。

3. 經腹腔暴腔，先清楚升主動脈外面的脂肪組織和心外膜組織。

4. 將針頭經左心室插入升主動脈（顏色變白的哦），并用鉗子固定。

5. 解開右心耳，同時開啟灌注泵。注意，不要隨便揭開心臟的其他部位，否則有時候可能會灌注成功但是絕大部分會造成灌注不成功，尤其。

6. 將 4 度的生理鹽水（好已動物的發白為標準，我們實驗室的大鼠約用 250ml）和多聚甲醛 (根據所取得材料而定) 依次灌入。

7. 整個過程均應將動物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。

因 SP 是單只大鼠進行實驗且在實驗中大鼠的活動空間受限，故有學者認為以上的臨床與實驗室表現可能與大鼠的群體隔離或活動空間受限有關，進一步研究發現，在實驗前群體飼養的動物當與群體隔離后也會出現攻擊行為增加，血漿中 CORT 增加，功能抑制等表現。大鼠活動空間受限也可引起血漿中 CORT 的水平的增加，這些結果與單平臺睡眠剝奪實驗中見到的類似，為克服SP 中大鼠與群體分離及活動空間受限的缺點，在 SP 基礎上進一步發展為多平臺睡眠剝奪法。

1.2多平臺睡眠剝奪法

M P法于1981年先應用在大鼠睡眠剝奪實驗中，在 M P中為擴展大鼠的活動空間將臺由 SP 中的 1 個增加至 7 個，仍將1只大鼠放在臺間進行睡眠剝奪試驗，因大鼠可以在 7個臺間自由活動，故活動范圍較 SP 中有明顯增大。經實驗比較，在M P中反映應激增強的一些指標，如上腺重量增加和胸腺重量減少仍然存在，甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加較SP的更高，提示 M P較SP有更強的應激性!考慮到大鼠為群居動物，單只大鼠實驗易導致與所在群體的隔離。為克服群體隔離所帶來的應激反應，有學者將 M P 法進一步改良發展為改良多平臺睡眠剝奪法!

造模方法步驟

一、.盲腸jie扎穿刺法（CLP）：

1.實驗開始前禁食不禁水12h，小鼠腹腔注射戊巴b妥鈉，待小鼠wan全ma醉后仰臥位固定。

2.對腹部噴酒精和碘伏消毒，去除腹部表面毛發，使用手術刀在腹壁切2cm切kou，暴露盲腸，在回盲瓣遠端結扎盲腸，然后用針ci穿刺盲腸2次，輕輕擠壓盲腸，使少量的腸內容物滲出，將盲腸復位，縫合腹膜和皮膚。

3.小鼠正常飼養6h后皮xia注she30ml/kg生理鹽水和30mg/kg的頭bao曲松。

藥xiao學實驗-減肥功能的動物試驗評價方法

1 測試項目

1.1 原理

這種方法是用高熱量食物誘導動物肥胖，然后給試驗樣品（肥胖模型），或者同時給高熱量食物給試驗樣品（肥胖預防模型），觀察其變化動物體重和體脂含量。

1.2 肥胖模型法

SPF級雄性大鼠，體重180-220g，8-12只/組。在屏障系統下，給大鼠喂養維持飼料并觀察5-7天。按體重隨機分為兩組，10只給予維持飼料作為空白對照組，60只給予高熱量模型飼料。每周記錄喂食量、灑食量、剩食量，稱體重1次。喂養2周后，將給予高熱量飼料的60只大鼠按體重增加進行排序，剔除1/3體重增加較低的抗肥胖大鼠。選取40只肥胖敏感大鼠給予高熱量飼料6周，空白對照組同時給予維持飼料。