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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇在此,提幾點(diǎn)原則和方法。
第①,做什么樣的實(shí)驗(yàn)?什么動(dòng)物適合本實(shí)驗(yàn)?做什么實(shí)驗(yàn),這是選題時(shí)就確定好了的。肯定是經(jīng)過(guò)論證的。無(wú)需多講。用什么樣的動(dòng)物呢?我想,大多是參照文獻(xiàn),再結(jié)合自己對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的了解。選題之時(shí)就肯定閱讀過(guò)很多文獻(xiàn)了,因此不會(huì)陌生。
如:做高、動(dòng)脈粥樣硬化,我想大多數(shù)人會(huì)選擇大鼠、兔子,也可以選金黃地鼠、鵪鶉,少數(shù)人會(huì)選小鼠,但我想用狗和猴的基本上不會(huì)有吧。因?yàn)橐x擇比較容易形成此疾病的動(dòng)物,且要易得。
所以,對(duì)于不太熟悉的人來(lái)說(shuō),要多看文獻(xiàn),參考別人是如何選擇的。就算是對(duì)動(dòng)物比較了解,系統(tǒng)學(xué)過(guò)這方面知識(shí)的,也要多看文獻(xiàn),綜合權(quán)衡。切忌隨意地憑空想像。
第二,采取什么樣的方法造模?做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通常是要造模的。選擇什么樣的方式?這要從實(shí)驗(yàn)的目的及條件入手。造,可以用手術(shù),也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素(STZ)。后者用得較多,且為國(guó)際認(rèn)同。
而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》,二是參照文獻(xiàn)。造模方法有時(shí)也決定了你的動(dòng)物選擇。像做手術(shù)造動(dòng)脈粥樣硬化,我想用大鼠比小鼠來(lái)得方便吧?
第三,經(jīng)費(fèi)承受能力如何?做實(shí)驗(yàn)也要精打細(xì)算。不可能為了所謂的高水平、技術(shù)而不顧實(shí)驗(yàn)室的條件。像做高脂動(dòng)物模型,假設(shè)經(jīng)費(fèi)只有一萬(wàn)多元,一定要弄個(gè)敲除APoE基因的小鼠來(lái)做,恐怕沒(méi)人認(rèn)同。多樣硬化模型(EAE)EAE模型可由來(lái)自髓鞘的蛋白如髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐劑(CFA)免yi誘導(dǎo),mian疫當(dāng)天及兩天后腹腔注射百ri咳毒su(PTX)而構(gòu)建。做一個(gè)簡(jiǎn)單的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn),你非得要用SPF實(shí)驗(yàn)室,這也是不太實(shí)際的,也是沒(méi)必要的。
膀胱結(jié)shi動(dòng)物模型
(1)方法 體重55~60g的幼齡大鼠,單籠飼養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料中加入5%的苯二甲酸(terephthalic acid, TPA),用此實(shí)驗(yàn)飼料喂養(yǎng)大鼠,連續(xù)14d,大鼠自由飲水。6周組及8周組大鼠PEF值與氣道壁纖維組織和平滑肌增sheng呈顯著負(fù)相關(guān)(P<。造模第十四日時(shí),動(dòng)物用戊ba比妥鈉ma醉后手術(shù)取出膀胱,將其置放于10%甲醛溶液固定,作常規(guī)組織切片,HE染色及 Von Kossa氏鈣顯示法染色,光鏡下觀察。
(2)特點(diǎn) 用含5%TPA飼料喂養(yǎng)14d后,模型大鼠膀胱腔內(nèi)均含有大小不等、數(shù)量不一的鈣化小體,鈣化小體周?chē)灰粚雍癖〔灰痪|(zhì)狀的物質(zhì)所包裹,小體內(nèi)的黑色鈣鹽呈分布不均的顆粒狀,有的可聚集成團(tuán)塊狀。如是大鼠,需手術(shù)剖腹,從幽門(mén)端向胃內(nèi)插入一塑料管,再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃,用pH7。本模型制作方法簡(jiǎn)便,造模時(shí)間短,模型成功率,重復(fù)性好。
多樣硬化模型(EAE)
EAE模型可由來(lái)自髓鞘的蛋白如髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐劑(CFA)免yi誘導(dǎo),mian疫當(dāng)天及兩天后腹腔注she百ri咳毒su(PTX)而構(gòu)建。髓磷脂特異性T細(xì)胞在外周被ji活,穿過(guò)血腦屏障進(jìn)入zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)并被重新ji活,引發(fā)一系列yan癥反應(yīng),導(dǎo)致脫髓鞘和軸突細(xì)胞凋亡,zui終導(dǎo)致神經(jīng)損傷和失去功能。使用標(biāo)準(zhǔn)化評(píng)分系統(tǒng)評(píng)估臨床癥狀,衡量疾病的誘導(dǎo)發(fā)生程度。亦可在動(dòng)物后,切開(kāi)動(dòng)物胸腔,直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟,直接用、吸管等吸血。病理組織染色切片 可見(jiàn)局部脫髓鞘和炎性白細(xì)胞浸潤(rùn)。百奧賽圖利用自主開(kāi)發(fā)制備的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A基因,同時(shí)敲進(jìn)人IL-17A基因)為針對(duì)人IL-17A靶點(diǎn)的MSzhi療yao效研究提供了一個(gè)可靠的MOG誘導(dǎo)的EAE模型。
shen大部切除所致的慢性衰模型
5/6shen切除手術(shù)一期法:成年雄性Wistar 大鼠,先切除右shen,隨后結(jié)扎左shen上、下極并切除之,不要損傷兩側(cè)shen上腺。切除之shen組織稱(chēng)重,以右shen重量減去所切除的左shenshen組織重量來(lái)間接估算殘余shen重量,并算出切除率。如要作腹腔注射或灌胃等操作時(shí),實(shí)驗(yàn)者應(yīng)戴上棉紗手套(有經(jīng)驗(yàn)者也可不戴),右手輕輕抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其,以防尾巴皮膚脫落,左手抓緊鼠兩耳和頭頸部的皮膚,并將大鼠固定在左手中,右手即可進(jìn)行操作。大鼠5/6shen切除后shen臟特征性改變有:shen臟早期代償性肥大的,shen小球高灌注、高濾過(guò)、高壓力,繼之出現(xiàn)shen小球硬化、毛xi血管囊萎陷、系膜進(jìn)行性擴(kuò)張、小管間質(zhì)性損害,后者表現(xiàn)為小管細(xì)胞萎縮、小管擴(kuò)張、間質(zhì)yan癥細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維化,zui終發(fā)展為進(jìn)行性shen功衰。