如何選擇固相萃取柱？

選擇固相萃取柱的關(guān)鍵除了要求的規(guī)格之外，決定分離性能的是它的填料。在選擇萃取柱時(shí)，必須根據(jù)待檢測(cè)樣品的種類及其物化性質(zhì)選擇合適的填料。固相萃取填料通常是色譜吸附劑，大致可以分為三大類，分別是以硅膠、高聚物、無(wú)機(jī)材料為基質(zhì)。但SOURCE 產(chǎn)品的粒徑只有30微米，不能滿足Protein A 介質(zhì)對(duì)粒徑一般要大于40微米的要求。納微經(jīng)過多年的努力開發(fā)出世l界領(lǐng)l先的微球制備技術(shù)，突破大單分散大粒徑多孔微球的制備難題，成為家生產(chǎn)單分散Protein A 親和層析介質(zhì)的公司。

層析填料裝置

錐形封頭一種負(fù)壓層析裝置，它包括：柱體上端設(shè)有快開式緊鎖鎖緊的上錐形封頭和上錐形卡套相互卡接，上錐形封頭上部設(shè)有負(fù)壓接口經(jīng)負(fù)壓閥、汽液分離器與負(fù)壓泵相連，柱體下端設(shè)有快開式緊鎖鎖緊的下錐形封頭和下錐形卡套相互卡接，下錐形封頭下部設(shè)有進(jìn)液接口經(jīng)進(jìn)液管道與三通閥體上部的出液接口相連，三通閥體下部分別設(shè)有兩個(gè)與進(jìn)液管道相連的進(jìn)液接口。

層析填料交換分離

離子交換層析根據(jù)化合物的凈電荷進(jìn)行分離。帶負(fù)電荷或正電荷的官能團(tuán)共價(jià)結(jié)合于固相載體基質(zhì)，分別成為陽(yáng)離子交換劑和陰離子交換劑。當(dāng)一個(gè)帶電荷的分子加入到帶有相反電荷的交換劑時(shí)，它就會(huì)被吸附，同時(shí)，帶相同電荷的離子和中性分子則被洗脫到層析柱的外水體積里。帶電荷分子的結(jié)合是可逆的，通常可用鹽或PＨ梯度洗脫吸附的分子。 離子交換層析可以有多種應(yīng)用，包括分離和純化生物分子，分離無(wú)機(jī)離子，試劑和水的去離子化，鹽轉(zhuǎn)換以及去除金屬離子、化乙錠和ＳＤＳ。 化合物的分離策略。如果分子在ＰＨ高于其等電點(diǎn)時(shí)穩(wěn)定，可使用陰離子交換樹脂。如果分子在ＰＨ低于其等電點(diǎn)時(shí)穩(wěn)定，則使用陽(yáng)離子交換樹脂。

層析填料壽命衰減的影響因素

樣品狀態(tài)

a.樣品澄清度：樣品越澄清對(duì)填料的壽命衰減影響越小。

b.樣品粘度：樣品的粘度越小，對(duì)填料壽命的影響越小。

c.樣品酸堿度：過酸過堿都會(huì)加速填料壽命的衰減。

d.樣品離子強(qiáng)度：離子強(qiáng)度越高填料壽命衰減的越快。

e.樣品成分組成：樣品成分越復(fù)雜，層析過程越復(fù)雜，填料的壽命衰減越快（這也與填料所處的工藝階段吻合，捕獲粗純階段填料壽命衰減的更快，精純階段填料壽命衰減的慢。）

層析工藝

a.柱床高度，流速及反壓越大，工藝過程填料受到的外力就會(huì)增大，填料的壽命衰減就會(huì)增大。

b.層析工藝過程的緩沖液的種類及洗脫的CV數(shù)也會(huì)影響填料的壽命，緩沖液越溫和對(duì)填料壽命衰減影響越小，洗脫CV數(shù)越小對(duì)填料壽命衰減影響越小。