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病理實驗外包常見的病理染色實驗是組化染色,用標記的特異性對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞的定性、定位或定量研究,這種技術稱為組織化學(immunohistochemistry)技術或細胞化學(immunocytochemistry)技術。根據抗原反應和化學顯色原理,組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記生物素、熒光素等的二抗進行反應,通過顯色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原反應產物,從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。組化的特點是特異性強、定位準確,因此能夠明確目的蛋白的細胞定位、亞細胞定位及多種蛋白之間的相互位置關系。組化在醫學上應用廣泛,尤其在臨床診斷和鑒別診斷中具有普遍認可的實用價值。其應用于低分化或未分化的鑒別診斷時,準確率可達50% -75%。造模期間,配合使用饑飽失常法,即:~56天,飽食2天,禁食1天。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。實驗~35天,大鼠自由飲用脫氧膽酸鈉溶液,同時每隔5天以60%乙醇灌胃(10ml/kg)一次,第36~91天,每3天交替飲用脫氧膽酸鈉或15%乙醇,同時每隔7天以60%乙醇灌胃一次。 實驗步驟
使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹透射電鏡檢測:通過電子束穿透細胞和組織,從而可以觀察細胞內的超微結構。其放大倍數更大,真空要求也更高。透射電子顯微鏡可以看到在光學顯微鏡下無法看清的小于0.2nm的亞顯微結構或超微結構。電子顯微鏡技術的應用是建立在光學顯微鏡的基礎之上的,光學顯微鏡的分辨率為0.2μm,透射電子顯微鏡的分辨率為0.2nm,也就是說透射電子顯微鏡在光學顯微鏡的基礎上放大了1000倍。透射電鏡的電子束通過樣品后由物鏡成像于中間鏡上,再通過中間鏡和投影鏡逐級放大,成像于熒光屏或照相干版上,分辨細微物質結構;三價鐵的亞鐵qing化物是一種很穩定的化合物,在反應后可用紅色染色劑進行復染,如核固紅、伊紅、中性紅等。能在看到表面的圖像的同時也看到內層物質。
用于電鏡檢查的標本必須制成50~100nm的超薄切片。常用的切片方法有:超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。對于液體樣品,通常是掛預處理過的銅網上進行觀察。南京英瀚斯,病理染色實驗服務平臺。