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實驗動物的選擇在此,提幾點原則和方法。
第①,做什么樣的實驗?什么動物適合本實驗?做什么實驗,這是選題時就確定好了的??隙ㄊ墙?jīng)過論證的。無需多講。用什么樣的動物呢?我想,大多是參照文獻,再結合自己對實驗動物的了解。選題之時就肯定閱讀過很多文獻了,因此不會陌生。
如:做高、動脈粥樣硬化,我想大多數(shù)人會選擇大鼠、兔子,也可以選金黃地鼠、鵪鶉,少數(shù)人會選小鼠,但我想用狗和猴的基本上不會有吧。因為要選擇比較容易形成此疾病的動物,且要易得。
所以,對于不太熟悉的人來說,要多看文獻,參考別人是如何選擇的。就算是對動物比較了解,系統(tǒng)學過這方面知識的,也要多看文獻,綜合權衡。切忌隨意地憑空想像。
第二,采取什么樣的方法造模?做動物實驗通常是要造模的。選擇什么樣的方式?這要從實驗的目的及條件入手。造,可以用手術,也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素(STZ)。后者用得較多,且為國際認同。
而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實驗方法學》,二是參照文獻。造模方法有時也決定了你的動物選擇。像做手術造動脈粥樣硬化,我想用大鼠比小鼠來得方便吧?
第三,經(jīng)費承受能力如何?做實驗也要精打細算。不可能為了所謂的高水平、技術而不顧實驗室的條件。像做高脂動物模型,假設經(jīng)費只有一萬多元,一定要弄個敲除APoE基因的小鼠來做,恐怕沒人認同。8周組大鼠出現(xiàn)明顯氣道壁增厚、氣道狹窄及顯著肺qi腫改變,氣道壁炎細胞浸潤、杯狀細胞化生、氣道壁壞死糜lan、纖維結締組織及平滑肌增sheng等評分均顯著高于對照組(P<。做一個簡單的鎮(zhèn)痛實驗,你非得要用SPF實驗室,這也是不太實際的,也是沒必要的。
膀胱結shi動物模型
(1)方法 體重55~60g的幼齡大鼠,單籠飼養(yǎng)。標準大鼠飼料中加入5%的苯二甲酸(terephthalic acid, TPA),用此實驗飼料喂養(yǎng)大鼠,連續(xù)14d,大鼠自由飲水。此方法為飲食誘導+化學試劑誘導,一般是用STZ加高脂高糖的膳食誘導來構建tang尿病模型模型。造模第十四日時,動物用戊ba比妥鈉ma醉后手術取出膀胱,將其置放于10%甲醛溶液固定,作常規(guī)組織切片,HE染色及 Von Kossa氏鈣顯示法染色,光鏡下觀察。
(2)特點 用含5%TPA飼料喂養(yǎng)14d后,模型大鼠膀胱腔內均含有大小不等、數(shù)量不一的鈣化小體,鈣化小體周圍被一層厚薄不一均質狀的物質所包裹,小體內的黑色鈣鹽呈分布不均的顆粒狀,有的可聚集成團塊狀。本模型制作方法簡便,造模時間短,模型成功率,重復性好。此外,動物來源必須充足,選用多胎分娩的動物對擴大樣本和重復實驗是有益的。
多樣硬化模型(EAE)
EAE模型可由來自髓鞘的蛋白如髓鞘少突膠質細胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐劑(CFA)免yi誘導,mian疫當天及兩天后腹腔注she百ri咳毒su(PTX)而構建。髓磷脂特異性T細胞在外周被ji活,穿過血腦屏障進入zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)并被重新ji活,引發(fā)一系列yan癥反應,導致脫髓鞘和軸突細胞凋亡,zui終導致神經(jīng)損傷和失去功能。使用標準化評分系統(tǒng)評估臨床癥狀,衡量疾病的誘導發(fā)生程度。因其對一定種類的動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用,能誘發(fā)許多動物的tang尿病,所以一般用它來構建糖tang尿病模型。病理組織染色切片 可見局部脫髓鞘和炎性白細胞浸潤。百奧賽圖利用自主開發(fā)制備的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A基因,同時敲進人IL-17A基因)為針對人IL-17A靶點的MSzhi療yao效研究提供了一個可靠的MOG誘導的EAE模型。
shen大部切除所致的慢性衰模型
5/6shen切除手術一期法:成年雄性Wistar 大鼠,先切除右shen,隨后結扎左shen上、下極并切除之,不要損傷兩側shen上腺。切除之shen組織稱重,以右shen重量減去所切除的左shenshen組織重量來間接估算殘余shen重量,并算出切除率。幫助一些因脊髓損傷而癱瘓的人接受康復治liao并使其行走更加自然。大鼠5/6shen切除后shen臟特征性改變有:shen臟早期代償性肥大的,shen小球高灌注、高濾過、高壓力,繼之出現(xiàn)shen小球硬化、毛xi血管囊萎陷、系膜進行性擴張、小管間質性損害,后者表現(xiàn)為小管細胞萎縮、小管擴張、間質yan癥細胞浸潤、纖維化,zui終發(fā)展為進行性shen功衰。